UNC8209는 인간 ccRCC 세포에서 TBK1을 선택적으로 분해합니다.

UNC8209가 ccRCC 세포에서 TBK1 분해를 유도하는 기전을 확인하기 위해 먼저 프로테아좀 의존성을 평가했습니다. 프로테아좀 억제제인 ​​MG132를 처리했을 때 UNC8209에 의한 TBK1 분해가 효과적으로 억제되었으며, 이는 분해 기전이 프로테아좀에 의존함을 시사합니다( 그림 2A ). 또한, CRISPR/Cas9를 이용하여 CRBN을 유전자적으로 제거했을 때 UNC8209에 의한 TBK1 분해가 억제되었으며, 이는 MG132 처리와 동일한 효과를 나타냈습니다( 그림 2B ). 이러한 결과들을 종합하면, UNC8209는 예상대로 CRBN 의존성 유비퀴틴-프로테아좀 경로를 통해 TBK1 분해를 매개한다는 것을 알 수 있습니다.

그림 2. UNC8209는 인간 ccRCC 세포에서 TBK1 단백질을 선택적으로 분해한다.

전체 캡션 표시

그림 뷰어

UNC8209의 선택성을 평가하기 위해, TBK1의 상당한 분해가 관찰되고 이차적인 하류 효과가 최소화되는 시점인 6시간 동안 1 μM UNC8209로 처리한 UMRC2 세포에서 전체 단백질체 프로파일링을 수행했습니다. 질량 분석을 통해 8,307개의 단백질을 확인하고 정량화했습니다( 표 S1 ). 이 중 16개의 단백질은 DMSO 처리 대조군과 비교하여 UNC8209 처리 시 발현량이 유의하게 감소했습니다(log 2 fold change ≤ -0.5, p < 0.05)( 그림 2C ).