두 종 모두에서 CueR은 Cu(I) 결합 부위에 작용하는 C112와 C120, 그리고 C 말단에 위치한 C129와 C130, 총 네 개의 시스테인 잔기를 가지고 있다. 금속 결합 부위에서의 스핀 라벨링은 Cu(I) 존재 하에서 반응을 수행함으로써 방지하였다. 또한, C129와 C130을 알라닌으로 변이시켜 이들 위치에서의 MTSSL 라벨링을 방지하였다( 107 ). 대장균 CueR에서는 금속 결합 도메인 근처의 M101R1, 금속 결합 도메인과 DNA 결합 도메인 사이의 루프에 위치한 G57R1, 그리고 DNA 결합 도메인 근처의 A16R1의 세 위치에 스핀 라벨을 도입하였다. 마찬가지로, P. aeruginosa CueR 에서도 세 위치를 선택하여 라벨링을 수행했습니다 . G11R1과 A33R1은 DNA 결합 도메인 근처에 위치하고, G57R1은 두 기능 도메인 사이의 루프 영역에 있습니다. G57R1 돌연변이는 두 종 간의 직접적인 비교를 위해 사용되었습니다. 그림 7은 단백질의 각 도메인에서 이러한 위치를 보여줍니다. 그림 7 B 와 C는 두 단백질 종의 구조적 정렬을 나타내며, E. coli CueR의 결정 구조는 회색으로, P. aeruginosa CueR 의 AlphaFold 예측 구조는 검은색으로 표시되어 있습니다.