그림 12. CsoR 올리고머 상태에 대한 ESR 분석.

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CW-ESR 스펙트럼, HPLC-SEC 결과 및 펄스 ESR 실험을 종합하면 A91R1 CsoR은 용액 내에서 이량체와 사량체 사이의 동적 평형 상태에 존재함을 알 수 있습니다. 이 평형은 Triton X-100을 첨가하거나 스핀 표지된 단백질을 야생형 단백질로 교환함으로써 이량체 쪽으로 이동할 수 있습니다. DNA 결합은 CsoR의 올리고머 상태를 크게 변화시키지 않지만, 추가 실험 결과 올리고머 내 소단위 교환 속도가 DNA 존재에 의해 어느 정도 영향을 받는 것으로 나타났습니다. 특히, 스핀 표지된 단백질이 야생형 단백질로 치환되는 과정은 DNA가 존재할 때 더 쉽게 일어나고 제한도 덜한 것으로 보입니다. 이는 CW-ESR 스펙트럼에서 DNA가 존재할 때 이동성 성분 집단이 약간 더 높은 것과 일치합니다( 121 ). 한 가지 가능한 설명은 DNA가 두 CsoR 이량체 사이에 위치하여 사량체 형태 사이의 접촉을 부분적으로 방해함으로써 소단위 교환을 가능하게 한다는 것입니다. 이러한 발견은 CsoR 메커니즘과 관련이 있을 수 있는데, 소단위체 간의 교환이 Cu(I) 결합 시 단백질이 DNA로부터 분리되는 데 기여하여 전사 개시를 가능하게 할 수 있기 때문이다. 이 결과는 CsoR의 독특한 메커니즘과 결정학적 방법으로는 접근할 수 없는 용액 상태의 거동을 밝히는 데 있어 ESR 분광법의 강력한 효능을 보여준다.

구리 금속 조절제부터 금속 단백질까지: ESR의 더욱 폭넓은 응용

CueR과 CsoR에 대한 상세한 연구는 ESR 분광법이 제공할 수 있는 기계론적이고 동적인 통찰력을 강조합니다.